A Uma das limitações da expressão de proteínas heterólogas emPichia pastorisé a incapacidade dessa levedura de realizar modificações pós-traducionais, como formação de pontes de dissulfeto e glicosilações de aminoácidos em geral.
B Nessa levedura, a clonagem do gene de interesse ocorre pela integração de um cassete de expressão no genoma da levedura, via recombinação homóloga, podendo ser realizada por uma recombinase da própria levedura.
C Ao contrário dos sistemas de expressão heteróloga em bactérias, a produção de proteínas heterólogas emPichia pastorispode ser realizada somente em pequena escala, já que o seu meio de cultura apresenta altas concentrações de metanol, que é altamente inflamável.
D Devido a sua parede celular espessa, a leveduraPichia pastoris não pode ser transformada pelo método de eletroporação, sendo mais utilizado o método de transformação por choque térmico.
E O uso de promotores induzidos por metanol para expressão do gene de interesse emPicchia pastorisnão é recomendado, pois a presença de metanol no meio de cultura pode causar produção excessiva da proteína de interesse, levando a uma condição tóxica para a levedura.