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#1710274

O DNA plasmidial pode ser isolado de culturas bacterianas por lise alcalina com SDS (Dodecil Sulfato de Sódio). Analise as alternativas a seguir e assinale a resposta correta em relação a essa técnica.

  • A solução alcalina desestabiliza a interação entre os pares de bases complementares e causa a separação e a precipitação das duas fitas de DNA plasmidial, mantendo o DNA cromossômico intacto em solução.
  • Detergentes aniônicos fortes promovem a superespiralização dos plasmídeos, o que leva a sua precipitação. Isso permite a sua separação do DNA genômico que se mantém em solução.
  • Durante a lise, as proteínas bacterianas, a parede celular quebrada e o DNA plasmidial desnaturado formam grandes complexos que são cobertos pelo SDS.
  • A exposição de suspensões bacterianas a detergentes aniônicos fortes em alto pH abre a parede celular, desnatura o DNA cromossômico e as proteínas e libera o DNA no sobrenadante.
  • Os complexos de proteínas, a parede celular e o DNA cromossômico ficam em solução quando íons sódio são trocados por íons potássio. Assim, nessa etapa, o DNA plasmidial precipitado pode ser recuperado por centrifugação e o restante (em solução), descartado.
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