A purificação de proteínas é uma metodologia na qual se busca obter
uma proteína de interesse a partir de uma amostra biológica, como
uma cultura de células ou mesmo uma excisão de diferentes tecidos.
A primeira etapa de qualquer purificação de proteínas está
fundamentada em métodos de solubilidade. Nessa etapa, proteínas
com características fisioquímicas muito diferentes daquelas da
proteína de interesse são removidas e a amostra em preparação
torna-se mais concentrada em proteínas com características
similares. Os procedimentos de purificação subsequentes envolvem
técnicas mais aprimoradas, baseadas em cromatografias, que são
capazes de separar as proteínas com características mais
semelhantes presentes na mistura, como mostra a figura abaixo.
Baseado no que mostra a figura e referente às diferentes
cromatografias em coluna utilizadas na purificação de proteínas, leia
a descrição a seguir:
“A cromatografia em que o ligante é preso a uma matriz insolúvel e,
quando uma mistura de proteínas é aplicada à coluna contendo o
ligante, a proteína de interesse se liga a essa matriz e as demais
proteínas passam livres através da coluna. Em seguida, a proteína de
interesse retida na coluna é removida por uma solução, de pH
diferente, contendo concentrações crescentes de solução salina ou
uma alta concentração do ligante livre.”
Essa técnica de cromatografia é conhecida por