A PCR em Tempo Real permite a quantificação de
ácidos nucleicos através do monitoramento da
fluorescência a cada ciclo. Analise as afirmativas a
seguir sobre os conceitos de Ct (Cycle Threshold) e
sondas TaqMan:
I. O valor de Ct é inversamente proporcional à quantidade inicial de DNA alvo na amostra; quanto menor o Ct, maior a concentração de partida.
II. As sondas TaqMan utilizam a atividade exonuclease 5' - > 3' da Taq DNA polimerase para clivar a sonda hibridizada, separando o fluoróforo repórter do quencher e gerando sinal.
III. O uso de corantes intercalantes como SYBR Green confere maior especificidade que as sondas TaqMan, pois eles se ligam apenas à sequência alvo específica, ignorando dímeros de primers.
Está correto o que se afirma em:
I. O valor de Ct é inversamente proporcional à quantidade inicial de DNA alvo na amostra; quanto menor o Ct, maior a concentração de partida.
II. As sondas TaqMan utilizam a atividade exonuclease 5' - > 3' da Taq DNA polimerase para clivar a sonda hibridizada, separando o fluoróforo repórter do quencher e gerando sinal.
III. O uso de corantes intercalantes como SYBR Green confere maior especificidade que as sondas TaqMan, pois eles se ligam apenas à sequência alvo específica, ignorando dímeros de primers.
Está correto o que se afirma em:
