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#3106848

As complexas questões atuais de pesquisa exigem uma profundidade de informação que ultrapassa a capacidade das tecnologias tradicionais da PCR. A terceira geração de PCR, a PCR digital ou dPCR, reduz essa lacuna por ser uma técnica simples e prática. Sobre dPCR é INCORRETO afi rmar que:

  • a dPCR utiliza as análises fi nais e as estatísticas de Poisson para quantificar o número absoluto de moléculas de ácido nucleico presentes em uma amostra.
  • pode-se realizar PCR digital em chips, discos microfluídicos, microarrays, placas tipo qPCR e microgotas ou cristais de goơ culas baseados em emulsões de óleo/água.
  • cada partição é analisada durante o ciclo de PCR para a detecção (reação posiƟ va) ou ausência (reação negativa) de um sinal fluorescente, e então o número absoluto de moléculas presentes na amostra é calculado. Ela não depende de uma curva padrão para a quantificação do alvo da amostra. A eliminação da dependência das curvas padrão reduz o erro e melhora a precisão.
  • tanto dPCR quanto a PCR em tempo real ou quantitativa (qPCR) podem ser usadas para quantificar ácidos nucleicos em uma amostra, sendo sensíveis e reprodutíveis.
  • algumas vantagens do parƟ cionamento são: alta tolerância para inibidores, aumenta a concentração efetiva, viabiliza a quantificação dos alvos de baixa abundância, detecta e discrimina variantes alélicas (SNPs).
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