Definição e princípio do método imunoenzimático de
ELISA:
I- os imunoensaios enzimáticos (ELISA) usam as propriedades catalíticas das enzimas para detectar e quantificar reações imunológicas (antígenos e anticorpos).
II- ELISA se baseia na formação de complexo imune (Ag
x Ac) resultado da interação antígeno / anticorpo. O
complexo imune interage com um anticorpo conjugado
a uma enzima (por exemplo peroxidase).
III- a enzima age no seu substrato (água oxigenada) e
catalisa a reação de desdobramento da água oxigenada
(H2O2) em H2O mais oxigênio singlete (O2).
IV- o produto de degradação do substrato (O2) oxida o
cromógeno por exemplo a tetrametilbenzidina (TMB).
O resultado positivo da reação é observado pelo desenvolvimento de cor.
V- no desenvolvimento da técnica de ELISA quantitativo
utilizam-se controles negativos (soros reconhecidamente negativos) e soros controles positivos (soros
reconhecidamente positivos).
Das afirmativas acima:
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