A No método direto, é utilizado um anticorpo primário ligado a um marcador e esse complexo se liga diretamente ao antígeno.
B No método indireto peroxidase antiperoxidase (PAP), o anticorpo secundário deve ser aplicado em baixa quantidade ou baixa concentração, para preservar o anticorpo primário.
C Os métodos avidina-biotina são considerados específicos, pois a avidina se liga a outras moléculas como antígenos, enzimas e anticorpos.
D Nos métodos de amplificação de polímeros, são aplicados anticorpos primários, seguidos de anticorpos secundários marcados com oxidases.