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#3538479

A extração de ácidos nucleicos é uma etapa fundamental para diversas aplicações em biologia molecular, como PCR, qPCR e sequenciamento de RNA (RNA-seq). A escolha do método apropriado deve considerar fatores como pureza, integridade e concentração do material extraído. Além disso, a presença de contaminantes, como proteínas ou solventes orgânicos, pode interferir na qualidade das análises subsequentes. Para garantir resultados confiáveis, diversas estratégias de controle de qualidade são empregadas, como espectrofotometria, eletroforese e fluorimetria. Assinale a estratégia mais apropriada para garantir a qualidade do RNA extraído antes de análises transcriptômicas.

  • Armazenar o RNA em temperatura ambiente logo após a extração, pois isso evita a formação de complexos com proteínas que poderiam comprometer a pureza.
  • Avaliar a integridade do RNA por eletroforese em gel de agarose ou em um bioanalisador, verificando a razão entre os rRNAs 18S e 28S, além de medir a razão 260/280 para detectar contaminantes proteicos.
  • Utilizar apenas o espectrofotômetro para medir a concentração do RNA, sem necessidade de testes adicionais, já que a absorbância em 260 nm é suficiente para avaliar a qualidade da amostra.
  • Aplicar reagentes inibidores de RNases apenas após a conversão do RNA em cDNA, pois nesse estágio a molécula já está estabilizada para análises subsequentes.
  • Empregar a precipitação com etanol como único método de purificação, sem realizar lavagens adicionais, pois esse processo remove todas as impurezas automaticamente.
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