A só deve ser realizada em recém-nascidos prematuros com peso igual ou maior que 1800 g.
B está contraindicada para recém-nascidos que estejam recebendo nutrição parenteral, devendo ser adiada por, pelo menos, 60 horas após o encerramento da terapia.
C recém-nascidos com peso menor ou igual a 1500 g, além da primeira coleta, deverão realizar nova coleta em papel filtro, no período compreendido entre o 16° e 28° dias de vida, para análise da hiperplasia adrenal congênita.
D deve ser adiada por 30 dias, caso o recém-nascido tenha recebido transfusão de sangue nas primeiras 48 horas de vida.
E o sangue para a realização do exame só deve ser coletado quando a criança atingir, pelo menos, 1500 g.