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#1811770

Após a realização da extração do DNA, na maioria das vezes se faz necessário conhecer qual foi o rendimento do procedimento antes de utilizá-lo nas análises subsequentes. A determinação da concentração das amostras de DNA normalmente é avaliada por meio de dois métodos: a espectrofotometria e a eletroforese. Ao se aplicar a análise por meio da espectrometria é correto afirmar que:

  • a determinação e/ou quantificação por espectrofotometria é feita por medição da quantidade de luz refletida pelo DNA em solução no comprimento de onda de 260 nm.
  • a concentração de DNA é inversamente proporcional a absorção de luz em um comprimento de onda específico.
  • é necessário realizar diluições das amostras de DNA na ordem de grandeza de 1 a 10 vezes para realizar a medição, uma vez que o volume das cubetas de espectrofotômetros é maior que as quantidades obtidas nas extrações.
  • é possível utilizar a referência do valor de absorbância (A) de 1,0 o qual corresponde a uma concentração de 50 µg de DNA (fita dupla) por mililitro (mL), para se calcular a concentração do DNA obtido das amostras.
  • determinados aparelhos específicos aplicados em medição da concentração de DNA utilizam apenas 10 µL de amostra sendo necessário a aplicação do fator de diluição.
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