A ajuste do pH em 8,5 com auxílio de tampão fosfato.
B dissolução do corante em pó em álcool metílico absoluto.
C agitação da solução com carvão ativado e posterior filtração.
D imersão em banho-maria a 55 ºC, por 30 minutos, antes do uso.
E adição de 90 mL de formalina a 10% para cada 1 000 mL de solução corante.