Durante uma aula prática de biologia molecular, os estudantes desenharam um par de primers para amplificação e clonagem de um gene de interesse em um plasmídeo para expressão heteróloga em bactéria. Para o desenho dos primers os estudantes utilizaram a sequência do gene de interesse e do mapa de restrição do plasmídeo. Após amplificação com os primers, o produto de PCR resolvido em um gel de agarose apresentou tamanho esperado. Em seguida, purificou-se este fragmento do gel e realizou-se a digestão com as enzimas de restrição escolhidas e ao avaliar a digestão em um gel de agarose, observou-se a formação de 4 fragmentos de tamanhos menores que o esperado. Qual a causa provável deste resultado?
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