Os métodos moleculares microbiológicos (MMM) têm sido utilizados
como forma de identificar e quantificar os microrganismos presentes
nos sistemas de petróleo e têm colaborado com grande auxilio nas
etapas de mitigação e monitoramento da biocorrosão. A
denaturing
gradient gel electrophoresis (DGGE) é uma técnica que utiliza o DNA
e a tecnologia de
polymerase chain reaction (PCR) para diferenciar
as espécies presentes em uma comunidade a partir de uma única
amostra. Nesse MMM, os fragmentos de DNA são então transferidos
para um gel gradiente desnaturante, separados com base em sua
sequência de DNA. O DNA migra através do gel e as diferentes fitas
de DNA presentes na amostra serão depositadas em intervalos
diferentes no gel, como mostra a figura a seguir:
Considerando os princípios da técnica de DGGE enquanto um MMM
para identificar e/ou quantificar os microrganismos agentes da
biocorrosão, analise as afirmativas abaixo:
I. O grau de desnaturação da fita de DNA depende de sua
composição de sequência de nucleotídeos, os pares de bases A–
T são mais fortes do que o par G–C, e a desnaturação parcial
resulta em uma diminuição da mobilidade através do gel com a
formação de uma banda de DNA.
II. A DGGE separa os produtos por diferenças de sequência de DNA,
o grau de desnaturação da fita de DNA depende de sua
composição de sequência de nucleotídeos. Portanto, durante a
DGGE os produtos com diferentes composições, embora com
números semelhantes de pares de bases, irão migrar diferentes
distâncias através do gel quando expostos a um gradiente de
condições desnaturantes.
III. Um gel com poucas bandas e uma única banda espessa, indica
uma comunidade dominada por uma única espécie, e um gel
com muitas bandas de intensidade semelhante indica uma
comunidade diversa dentro de uma espécie. A comparação das
comunidades em diferentes amostras, de diferentes locais ao
longo de um sistema de processo, fornece informações
significativas sobre os ambientes ao longo do processo e como
isso afeta as populações microbianas.
Assinale