A O espaço físico em que um biotério deve estar localizado tem que ser em uma área afastada e tranquila da Instituição, requerendo atenção especial em relação à biossegurança.
B A iluminação do biotério deve ser natural de modo a manter as alternâncias de períodos de luz e escuridão, mimetizando, assim, um ambiente o mais natural possível a fim de que as colônias de criação realizem uma produção uniforme.
C O biotério deve dispor de paredes laváveis (tinta a óleo ou epóxi) e, se houver janelas, elas devem ter telas e os vidros pintados para que a luz solar não interfira na iluminação artificial.
D O forro do biotério deverá ser lavável e com bom isolamento, o piso deve apresentar-se com instalação de antiderrapantes, cantos das paredes arredondados, portas largas (em torno de 1m) e com visor que permita supervisionar o trabalho na sala.
E A divisão interna do biotério deverá, basicamente, ter espaços para a criação e a manutenção de animais, higienização do material e do pessoal da área profissionalizante e da área administrativa.