A Inibição da enzima por um produto da reação, levando a um feedback negativo. A solução é adicionar um composto que remova o produto da reação.
B Degradação da enzima devido a altas temperaturas, mesmo que a reação seja realizada na temperatura ótima. A solução é reduzir a temperatura da reação.
C Exaustão do substrato, fazendo com que a enzima não tenha mais moléculas para reagir. A solução é aumentar a concentração inicial do substrato.
D Contaminação da amostra com outras enzimas que competem pelo mesmo substrato. A solução é purificar a amostra antes de realizar o ensaio.