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#3570772

A presença de sequências espaçadores dentro dos genes dos eucariotos, denominada de íntrons, representa uma dificuldade a mais para as empresas de Biotecnologia no que se refere a produção industrial de proteínas e anticorpos com finalidades de desenvolvimento de kits diagnósticos, e de medicamentos/vacinas para tratamento/ prevenção de doenças crônicas e/ou infecciosas. Uma das formas para retirar estes íntrons, preservando apenas a região codificante dos genes, é a obtenção do DNA a partir de uma fita de RNA mensageiro maduro. A sequência correta das etapas para a obtenção e clonagem de um DNA é: 

  • extração de RNA total, purificação por cromatografia de afinidade, hibridização com primer, transcrição reversa, digestão enzimática e ligação.
  • purificação por cromatografia de afinidade, extração de RNA total, hibridização com primer, digestão enzimática, transcrição reversa e ligação.
  • extração de RNA total, hibridização com primer, purificação por cromatografia de afinidade, digestão enzimática, transcrição reversa, e ligação.
  • purificação por cromatografia de afinidade, hibridização com primer, extração de RNA total, transcrição reversa, digestão enzimática e ligação.
  • extração de RNA total, purificação por cromatografia de afinidade, hibridização com primer, digestão enzimática, transcrição reversa, e ligação.
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