A presença de parede de peptideoglicano que retém o corante.
B afinidade pelo corante violeta de metila.
C presença do lugol que cora as estruturas que foram descoradas com o álcool etílico.
D presença da safranina, que, junto com o lugol, chamado de mordente, forma o complexo iodo‐pararosanilina que fixa o corante primário.
E presença da fucsina que se incorpora à parede da bactéria.