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A determinação da creatinina é ferramenta importante e precisa no diagnóstico da função renal. A substância, sintetizada principalmente no fígado e nos rins, é produzida e excretada em um ritmo constante independentemente da dieta, grau de hidratação e metabolismo proteico. Por isso, é parte comum da rotina laboratorial. A reação enzimática colorimétrica se dá:

  • A creatinina, presente na amostra, através da ação da enzima Creatinina Amidohidrolase é convertida em Creatina. Esta é hidrolisada pela ação da enzima Creatina Amidinohidrolase à Sarcosina e Uréia. A Sarcosina, após desmetilação oxidativa, pela Enzima Sarcosina Oxidase, produz Glicina, Formaldeído e Peróxido de Hidrogênio. O Peróxido de Hidrogênio reage então com o TOPS e 4-aminoantipirina, na presença da Peroxidase, produzindo Quinoneimina. A absorbância máxima desta formação é de 546nm e a intensidade de cor do produto é proporcional à concentração de creatinina na amostra.
  • A creatinina é hidrolisada a íons Amônio e CO2 pela Urease. Em pH alcalino e na presença de Salicilato e Hipoclorito de Sódio, a Amônia origina um composto esverdeado, cuja intensidade de cor é proporcional à concentração de creatinina na amostra analisada
  • Os quilomicrons, as lipoproteínas de muita baixa densidade e as lipoproteínas de baixa densidade são quantitativamente precipitadas com fosfotungstato e íons magnésio. Após centrifugação, o sobrenadante contém as lipoproteínas de elevada densidade cujo colesterol é quantificado fotometricamente mediante as reações acopladas descritas abaixo. A absorbância do complexo formado (vermelho), medida em 500 nm, é diretamente proporcional à concentração de creatinina da amostra.
  • A creatinina catalisa a oxidação para ácido glicônico e peróxido de hidrogênio. Através de uma reação oxidativa de acoplamento catalisada pela peroxidase, o peróxido de hidrogênio formado reage com 4-aminoantipirina e fenol formando um complexo de cor vermelha (antipirilquinonimina), cuja absorbância medida em 505 nm, é diretamente proporcional à concentração de creatinina na amostra.
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