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#1811774

A técnica de multiplicação de moléculas de DNA em laboratório desenvolvida por meio de uma reação em cadeia da polimerase (PCR) se baseia no processo celular de duplicação de DNA. É caracterizado como uma das grandes invenções da Ciência e, consequentemente, vem sendo uma das técnicas mais realizadas em laboratórios de biologia molecular. O método de PCR apresenta algumas etapas distintas: desnaturação, anelamento e extensão (ou polimerização).
Sobre o anelamento é correto afirmar que:

  • a DNA polimerase promove a ligação fosfodiéster entre o último nucleotídeo da nova fita e nucleotídeo trifosfatado a ser adicionado.
  • pela disponibilidade de extremidade 3’OH dosprimers, a enzima DNA polimerase realiza a síntese das novas fitas utilizando as originais como molde.
  • as moléculas de DNA são inicialmente desnaturadas por alta temperatura (acima de 90°C).
  • em razão da característica antiparalela da dupla fita de DNA, é citado que umprimerse liga na extremidade 3’ da região alvo (primerdireto ouforward), enquanto o outro se liga na extremidade 5’, na fita oposta (primerreverso ou reverse).
  • as duas fitas das moléculas são separadas pelo rompimento das ligações de hidrogênio entre as bases nitrogenadas de nucleotídeos complementares.
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