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#2723010

Na detecção das desidrogenases pelo método de redução pelos sais tetrazólio, seguem-se as etapas de fixação, lavagem e revelação da ação enzimática. A fixação deve ser branda com aldeído fórmico e glutárico em baixas concentrações, durante poucos minutos, seguida de lavagem longa para retirar resíduos de aldeído livre. A incubação com solução reveladora, contendo tampão fosfato, substrato da enzima, diestiril nitrobluetetrazólio (DS-NBT), e dimetilsulfóxido (DMSO), permitirá revelar a ação enzimática. Todos os experimentos necessitam de controles negativos da reação, e para isto serão usadas as condições de incubação abaixo, EXCETO:

  • ausência de substrato.
  • presença de inibidor da cadeia respiratória.
  • ausência de DMSO.
  • presença de inibidor da enzima.
  • ausência de coenzima.
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