A Na técnica RT-PCR, moléculas de RNA são convertidas em cDNA (DNA complementar) e depois amplificados pela PCR. A enzima essencial para essa conversão funciona como uma RNA polimerase dependente de DNA.
B As enzimas de restrição, como aEcoRI, têm a função de liberar fragmentos de DNA plasmidial ligados em vetores de clonagem. A sua ação ocorre em sítios inespecíficos, o que possibilita a clivagem de vários insertos em muitas combinações.
C Após o sequenciamento parcial ou total de um genoma, deve-se proceder à sua análise filogenética. Sequências de nucleotídeos são alinhadas e comparadas para se construir árvores filogenéticas de UPGMA que revelam o relacionamento evolutivo, identidade, similaridades e divergências genéticas, sendo possível, inclusive, identificar raças eformae specialesde fitopatógenos.
D Na transformação deEscherichia colicom um DNA de interesse, pode empregar-se a eletroporação, técnica que consiste em misturar DNA com células bacterianas “competentes” e aquecê-las em banho-maria (42 ºC) por 2 minutos antes de se proceder à emissão de pulsos elétricos. Pequenos orifícios são momentaneamente formados na membrana da bactéria e ocorre a penetração do DNA.
E Todas as afirmativas são incorretas.