O método atualmente mais utilizado para o diagnóstico
de Zika, Chikungunya e Dengue é o RT-qPCR. A técnica
consiste na transcrição reversa do RNA viral para uma
molécula de DNA complementar (cDNA), submetida posteriormente a amplificação por PCR. Esse processo inclui
basicamente três etapas: desnaturação, anelamento e
amplificação. O diferencial da técnica de RT-qPCR é a
utilização de fluorescência para monitorar a amplificação
do material genético em tempo real e quantificá-lo de
forma automatizada. A quantidade da fluorescência emitida é proporcional à concentração do RNA/DNA alvo na
amostra original. Esse sinal fluorescente pode ser emitido
através da utilização de sondas, marcadas com um fluoróforo na extremidade 5’ e uma molécula sequestradora de
fluorescência, quencher, na extremidade 3’. Em relação a
técnica de RT-qPCR podemos afirmar, EXCETO:
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