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#3570784

O método atualmente mais utilizado para o diagnóstico de Zika, Chikungunya e Dengue é o RT-qPCR. A técnica consiste na transcrição reversa do RNA viral para uma molécula de DNA complementar (cDNA), submetida posteriormente a amplificação por PCR. Esse processo inclui basicamente três etapas: desnaturação, anelamento e amplificação. O diferencial da técnica de RT-qPCR é a utilização de fluorescência para monitorar a amplificação do material genético em tempo real e quantificá-lo de forma automatizada. A quantidade da fluorescência emitida é proporcional à concentração do RNA/DNA alvo na amostra original. Esse sinal fluorescente pode ser emitido através da utilização de sondas, marcadas com um fluoróforo na extremidade 5’ e uma molécula sequestradora de fluorescência, quencher, na extremidade 3’. Em relação a técnica de RT-qPCR podemos afirmar, EXCETO:

  • possui alta especificidade.
  • permite a detecção simultânea de diferentes alvos.
  • tem menor probabilidade de resultados falso-positivos.
  • tem menor reprodutibilidade, quando comparada à PCR convencional.
  • permite o diagnóstico quantitativo dos vírus.
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