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#3570190

A cromatografia por interações hidrofílicas (HILIC, do inglês hydrophilic interaction chromatography) é uma modalidade de separação muito utilizada em bioanálises, na qual é empregada uma fase estacionária mais polar do que na cromatografia a líquido de ultra eficiência no modo fase reversa, e uma fase móvel com pouca concentração de água ou tampão, sendo normalmente > 70% em solvente orgânico, tipicamente acetonitrila. A utilização do modo de separação HILIC propicia algumas vantagens quando comparada a outros modos de separação como a fase normal ou fase reversa, entre as quais estão as relacionadas abaixo, EXCETO:

  • diminuição da pressão do sistema, devido à redução da viscosidade da fase móvel, em função da alta concentração de solvente orgânico na fase móvel.
  • aumento da detectabilidade quando o detector de espectrometria de massas é utilizado, uma vez que o processo de ionização dos analitos é favorecido com a alta concentração de solvente na fase móvel.
  • maiores retenções e eficiências de separação de analitos polares com baixa retenção no modo em fase reversa, sem a necessidade de utilização de aditivos de pareamento iônico.
  • compatibilidade com técnicas de extração que utilizam altas concentrações de solvente orgânico, como a extração em fase sólida (SPE, do inglêssolid phase extraction) ou extração líquido-líquido, o que permite a eliminação das etapas de evaporação e reconstituição, facilitando e simplificando a preparação de amostra.
  • fatores tais como o pH e a concentração iônica da fase móvel, além da temperatura da coluna não influenciam a seletividade e a sensibilidade e não precisam ser otimizados durante o desenvolvimento de métodos.
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