A álcool-ácido-resistência, relacionada à existência de LPS e ácidos teicóicos na parede celular das bactérias alvo, o que não ocorre em outros gêneros bacterianos.
B formação do complexo iodopararosanilina na parede bacteriana, que dificulta sua descoloração pelo álcool.
C álcool-ácido-resistência, relacionada à existência na parede celular de alguns gêneros bacterianos de lipídeos fortemente ligados, o que não ocorre em outros.
D premissa de que algumas bactérias apresentam corpúsculos citoplasmáticos localizados nas regiões da célula bacilar que se coram pelo Lugol forte, se evidenciando em contraste com o corpo bacilar que se cora em verde-azulado.
E ação do álcool e o ácido clorídrico que descoram o Lugol deixando que o corante de fundo apareça com coloração avermelhada.